摘要：目的本研究以合成筛选部位选择性前列腺癌治疗药物为目的,通过在苯并环磷酰胺的结构中引入硝基,该硝基在肿瘤细胞中在E.coli硝基还原酶的作用下还原成羟氨或氨基后的推电子作用,使得环磷酰胺破裂释放出活性氮芥而发挥疗效.从而改变环磷酰胺的活化部位.并籍此来增强环磷酰胺类药物对前列腺癌的选择性.减低系统毒性与耐药性.对以基因导向酶前药治疗策略为目的所合成的硝基环磷酰胺类化合物的还原性及细胞增殖抑制作用进行研究.方法以化学合成方法制得了硝基苯并环磷酰胺化合物6a-d,以Pd/C催化下氢化化学还原和E.coli硝基还原酶进行还原性研究以E.coli硝基还原酶(T116)和人醌氧化还原酶(NQO1F179)表达细胞(V79)进行细胞增殖抑制作用研究.结果用Pd/C催化下氢化选择性还原硝基,化合物6b和6c均能高收率地获得相应氨基物.E.coli硝基还原酶试验中,于pH7.0的10mmol/L磷酸盐缓冲溶液中,在37℃下.上述0.2mmol/L硝基苯基环磷酰胺和E.coli 1.8ug共同培养.不同时间点所取样液迅速冷冻,以高效液相色谱法测定样液中原料残存量.结果,6a.d的还原半衰期为5～7min.30min后的原料残余量小于10％.6b的还原速度稍慢.半衰期约为15min,30min后的原料残余量也达到10％以下.6c的还原速度最慢,30min时原料残留在58％以上,而且.随着时间的延长不再有明显变化.测定了化合物6a～d对E.coli硝基还原酶(T116)和人醌氧化还原酶(NQ01 F179)表达细胞(V79)的毒性.细胞在药物中的暴露时间为72h,药物试验最大浓度是100uM.结果,只有化合物6b的IC50为61uM外.其它几个化合物在100uM下均没有表现出细胞毒性.结论所设计合成的对位硝基取代苯并环磷酰胺化合物6a～d在pH7.0的磷酸盐缓冲溶液中,37℃下均相当稳定:6a～d都是E.coli硝基还原酶的底物,在pH7.0和37℃下,酶催化还原半衰期为7—24min;然而,在细胞毒性试验中,只有以氧原子和硝基苯环的环磷酰相连的6b和6d对E.coli硝基还原酶表达细胞的选择性毒性在30倍以上.因此,6b和6d为进一步通过结构修饰筛选选择性毒性的基因导向性肿瘤治疗药物提供了一类新的结构类型.
