单个核细胞

摘要： 背景:如何应用中药干预肠黏膜屏障损伤后的自噬失衡状态,从而最终干预胃肠道急性移植物抗宿主病的发生是造血干细胞移植后亟需解决的问题.目的:探讨黄芩汤干预急性肠道移植物抗宿主病的具体机制.方法:CB6F1小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、黄芩汤低剂量组、黄芩汤中剂量组、黄芩汤高剂量组,每组16只.模型对照组及黄芩汤低、中、高剂量组小鼠在60Co全身照射后4 h内(照射总剂量8 Gy),经尾静脉输注Balb/c H-2d小鼠单个核细胞悬液(骨髓细胞8×107/只+脾细胞8×107/只).造模后当天开始分别给予不同浓度黄芩汤灌胃,模型组及正常对照组灌胃等容量的生理盐水,连续应用15 d.最后一次灌胃后8 h取材,每组取6只小鼠小肠组织,采用PCR和Western blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1、P62表达水平,苏木精-伊红染色进行小肠黏膜病理分级评分,透射电镜观察小肠黏膜上皮细胞自噬泡结构;每组剩余10只(除正常对照组)小鼠进行临床急性移植物抗宿主病分级并记录生存时间.结果 与结论:①应用黄芩汤后,小鼠存活时间显著延长,临床急性移植物抗宿主病评分显著降低,小肠黏膜病理分级评分显著下降,黄芩汤中、高剂量组评分较模型对照组下降最显著,且黄芩汤中、高剂量组之间无显著差异;②模型对照组小鼠小肠组织自噬相关指标LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1水平显著低于正常对照组(P<0.01),P62水平显著高于正常对照组(P<0.01),黄芩汤可以促进LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1水平的恢复并下调P62水平(P<0.01);③透射电镜观察黄芩汤治疗组的自噬泡明显比模型对照组增多,且伴有如线粒体等重要细胞器形态的恢复;④结果表明,黄芩汤通过干预自噬相关蛋白,促进肠道急性移植物抗宿主病自噬稳态的恢复,保护肠黏膜屏障从而减轻了移植后肠道的排异,有望成为治疗急性移植物抗宿主病的新方法.

摘要： 背景:如何应用中药干预肠黏膜屏障损伤后的自噬失衡状态,从而最终干预胃肠道急性移植物抗宿主病的发生是造血干细胞移植后亟需解决的问题。目的:探讨黄芩汤干预急性肠道移植物抗宿主病的具体机制。方法:CB6F1小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、黄芩汤低剂量组、黄芩汤中剂量组、黄芩汤高剂量组,每组16只。模型对照组及黄芩汤低、中、高剂量组小鼠在60Co全身照射后4 h内(照射总剂量8 Gy),经尾静脉输注Balb/c H-2d小鼠单个核细胞悬液(骨髓细胞8×107/只+脾细胞8×107/只)。造模后当天开始分别给予不同浓度黄芩汤灌胃,模型组及正常对照组灌胃等容量的生理盐水,连续应用15 d。最后一次灌胃后8 h取材,每组取6只小鼠小肠组织,采用PCR和Western blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1、P62表达水平,苏木精-伊红染色进行小肠黏膜病理分级评分,透射电镜观察小肠黏膜上皮细胞自噬泡结构;每组剩余10只(除正常对照组)小鼠进行临床急性移植物抗宿主病分级并记录生存时间。结果与结论:(1)应用黄芩汤后,小鼠存活时间显著延长,临床急性移植物抗宿主病评分显著降低,小肠黏膜病理分级评分显著下降,黄芩汤中、高剂量组评分较模型对照组下降最显著,且黄芩汤中、高剂量组之间无显著差异;(2)模型对照组小鼠小肠组织自噬相关指标LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1水平显著低于正常对照组(P<0.01),P62水平显著高于正常对照组(P<0.01),黄芩汤可以促进LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1水平的恢复并下调P62水平(P<0.01);(3)透射电镜观察黄芩汤治疗组的自噬泡明显比模型对照组增多,且伴有如线粒体等重要细胞器形态的恢复;(4)结果表明,黄芩汤通过干预自噬相关蛋白,促进肠道急性移植物抗宿主病自噬稳态的恢复,保护肠黏膜屏障从而减轻了移植后肠道的排异,有望成为治疗急性移植物抗宿主病的新方法。

摘要： 骨关节炎是一种可导致关节疼痛、活动障碍、畸形的慢性疾病。临床研究发现,单个核细胞关节腔内注射治疗OA可减轻疼痛,修复关节软骨损伤,促进软骨再生,阻止或延缓病程进展,效果优于玻璃酸钠,且安全性较好。但是,该方法存在注射剂量、次数、观察指标不统一,以及缺乏严格的单个核细胞质量控制等问题。目前临床仅开展了骨髓、脂肪单个核细胞治疗骨关节炎的研究,而动物实验证实外周血单个核细胞治疗骨关节炎亦有较好的效果,且细胞获取创伤小、方便、患者接受度高,应是单个核细胞治疗骨关节炎临床研究的新方向。该文对单个核细胞治疗骨关节炎临床研究进展进行综述。

摘要： 目的探究克罗恩病(CD)患者外周血单个核细胞中miR-27a的表达水平及意义。方法选择2016年8月至2017年3月在浙江衢化医院就诊的114例CD患者作为研究对象。采用Ficoll密度梯度离心法提取CD患者外周血中的单个核细胞。采用实时荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞中miR-27a的表达水平,并分析其与患者预后的关系。结果在治疗2周、治疗6周时,预后良好组患者外周血单个核细胞中miR-27a的表达水平均高于预后不良组,差异均有统计学意义(P均<0.001)。随着治疗时间延长,两组miR-27a的表达水平均呈升高趋势。治疗6周时的miR-27a水平判断CD预后的ROC曲线下面积(AUC)大于治疗前及治疗2周时,差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,疾病行为(穿透型)、肛周病变是CD患者预后的独立危险因素(P均<0.05),治疗6周时的miR-27a水平是CD患者预后的独立保护因素(P<0.05)。结论CD患者外周血单个核细胞中miR-27a的表达水平越低,提示患者发生预后不良的风险越高。治疗6周时的外周血单个核细胞中miR-27a的水平判断CD患者的预后具有较高价值。

摘要： 目的探讨变应性鼻炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA-146a(miR-146a)、信号转导和转录激活因子5b(STAT5b)的表达及其临床意义。方法选取2017年1月至2020年12月在陕西中医药大学第二附属医院治疗的87例变应性鼻炎患者纳入观察组(其中轻度39例,中重度48例),同时选取在我院治疗的鼻中隔偏曲患者80例作为对照组,检测并比较两组患者PBMC中的miR-146a和STAT5b表达水平,同时采用Pearson法分析miR-146a、STAT5b相对表达量与鼻部症状评分相关性。结果观察组患者PBMC中miR-146a和STAT5b相对表达量分别为2.15±0.98和0.58±0.18,明显低于对照组的3.65±1.00和1.53±0.34,差异均具有统计学意义(P<0.05);观察组中重度患者PBMC中miR-146a和STAT5b相对表达量分别为1.94±0.92和0.41±0.16,明显低于轻度患者的2.41±0.97和0.79±0.20,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者PBMC中miR-146a和STAT5b相对表达量与鼻部症状评分呈负相关(r=-0.544、-0.577,P<0.05),miR-146a与STAT5b呈正相关(r=0.645,P<0.05)。结论变应性鼻炎患者PBMC中miR-146a和STAT5b表达下调,与患者病情程度呈负相关,同时两者间存在正相关。

摘要： 单个核细胞(mononuclear cells,MNCs)是多种免疫细胞及多能干细胞/祖细胞组成的细胞群体,根据来源主要分为脐带血单个核细胞、骨髓单个核细胞和外周血单个核细胞。MNCs在体内可发挥抑制细胞凋亡、促进损伤组织干细胞的分化和增殖、促进新生血管形成和调节局部免疫微环境的作用,作用机制可能与归巢及分泌与旁分泌作用有关。MNCs在生殖系统疾病治疗中的应用研究主要涉及卵巢早衰、宫腔粘连和反复种植失败,研究所涉及的MNCs种类、移植途径及临床试验开展情况各有不同。外泌体、生物支架及基因治疗有望成为MNCs治疗女性生殖系统疾病的新探索点。但MNCs在应用中仍存在不容忽视的问题,包括移植途径及浓度对效果的影响等。

摘要： 目的观察系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因3(SNHG3)的表达变化,并探讨其临床意义。方法收集SLE患者和健康对照者外周血单个核细胞(PBMCs:T细胞、B细胞和单核细胞),采用RT-PCR检测SNHG3,探讨其与SLE患者病情(SLEDAI评分、24小时尿蛋白)的关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)评价外周血单个核细胞中SNHG3对SLE诊断的准确度。结果与健康对照者相比,SLE患者外周血单个核细胞中SNHG3表达升高,在单核细胞中表达最高(P<0.001)。单核细胞中SNHG3表达与SLEDAI评分、24小时尿蛋白呈正相关(r分别为0.9493、0.6733,P均<0.01)。外周血单核细胞中SNHG3诊断SLE的曲线下表面积(AUC)为0.8796(P<0.05),95%置信区间:0.752~0.95,灵敏度88.5%,特异度77.7%。结论SLE患者外周血单个核细胞中lncRNA-SNHG3表达升高,以单核细胞中表达最高;单核细胞中lncRNA-SNHG3表达与病情有关,对SLE诊断准确度高。

摘要： 目的探讨慢阻肺(COPD)患者外周血单个核细胞lncRNA SNHG5的表达与炎症因子水平相关性.方法选取COPD稳定期患者80例,急性加重期患者80例,健康志愿者80名为对照组.分离外周血单个核细胞,RT-PCR检测lncRNA SNHG5、核苷酸结合寡聚化结构域1(NOD1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的mRNA表达;Western blot检测NOD1、NLRP3的蛋白表达;酶联免疫吸附法检测血清C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6(IL-6)表达水平.结果COPD急性加重期组lncRNA SNHG5的表达水平明显低于COPD稳定期组和对照组,COPD稳定期组明显低于对照组(P<0.05).COPD急性加重期组NOD1、NLRP3的mRNA和蛋白表达水平明显高于COPD稳定期组和对照组,COPD稳定期组明显高于对照组(P<0.05).COPD急性加重期组血清C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、IL-6水平明显高于COPD稳定期组和对照组,COPD稳定期组明显高于对照组(P<0.05).Pearson相关性分析显示:COPD患者外周血单核细胞中lncRNA SNHG5表达与血清C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、IL-6呈负相关关系(r=-0.719、-0.734、-0.760,均P<0.001).COPD患者外周血单核细胞中NOD1、NLRP3表达与血清C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、IL-6呈正相关关系(r=0.736、0.750、0.728,均P<0.001;r=0.765、0.792、0.780,均P<0.001).结论慢阻肺患者外周血单核细胞中lncRNA SNHG5、NOD1、NLRP3可能通过调控炎症因子C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、IL-6的表达参与COPD病情的发生与进展,其结果可用于临床诊断和预后评估.

摘要： 目的研究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者外周血单个核细胞(PBMC)乏氧诱导因子1a-反义RNA 1(HIF1a-AS1)和血清自噬基因beclin1水平变化及其临床意义。方法2019年1月~2021年4月我院诊治的NASH患者118例(早期纤维化、进展期纤维化和肝硬化分别为43例、46例和29例)和同期健康体检者118例,使用全自动生化分析仪检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,采用实时荧光定量PCR法检测PBMC HIF1a-AS1水平,采用ELISA法检测血清beclin1水平。结果NASH患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(5.9±1.6)mmol/L、(6.2±0.5)mmol/L、(2.4±0.6)mmol/L、(3.7±0.9)mmol/L、(1.9±0.2)和(5.7±1.9)ng/mL,显著高于健康者【分别为(4.8±0.7)mmol/L、(5.3±0.3)mmol/L、(1.3±0.3)mmol/L、(2.3±0.6)mmol/L、(1.0±0.1)和(4.1±1.5)ng/mL,P<0.05】,而血清HDL-C水平为(1.2±0.2)mmol/L,显著低于健康者【(1.4±0.3)mmol/L,P<0.05】;肝硬化患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(6.8±2.0)mmol/L、(6.8±0.8)mmol/L、(2.8±0.7)mmol/L、(4.4±1.2)mmol/L、(2.5±0.3)和(6.4±2.1)ng/mL,显著高于早期纤维化患者【分别为(5.2±1.1)mmol/L、(5.7±0.4)mmol/L、(1.9±0.5)mmol/L、(3.1±1.0)mmol/L、(1.4±0.1)和(5.1±1.3)ng/mL,P<0.05】;49例有高血压、糖尿病或/和高脂血症合并症的NASH患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(6.5±1.9)mmol/L、(6.9±0.8)mmol/L、(2.7±0.8)mmol/L、(4.0±1.1)mmol/L、(2.2±0.3)和(6.3±2.0)ng/mL,显著高于69例无合并症者【分别为(5.5±1.3)mmol/L、(5.7±0.4)mmol/L、(2.2±0.5)mmol/L、(3.5±0.7)mmol/L、(1.7±0.2)和(5.3±1.6)ng/mL,P<0.05】,而血清HDL-C水平为(1.1±0.2)mmol/L,显著低于无合并症者【(1.3±0.4)mmol/L,P<0.05】。结论NASH患者PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平异常升高,监测其水平可能有助于病情评估。

摘要： 目的:验证一种新型、尚未报道的体外扩增原代NK细胞的方法,同时检测其杀伤活性。方法:采集6位健康志愿者的静脉血共6份,分离外周血单个核细胞。自然杀伤(NK)细胞诱导培养试剂培养14天。利用流式细胞术检测NK细胞所占比例,将K562、THP-1细胞作为靶细胞并用CFSE标记,以效靶比2:1加入扩增后的NK细胞,利用流式细胞术检测靶细胞凋亡。结果:通过14天的细胞培养,利用自然杀伤(NK)细胞诱导培养试剂培养的NK细胞扩增约300倍。NK细胞纯度达50%左右。体外杀伤实验结果显示,扩增后的NK细胞与靶细胞共培养4 h杀伤能力可达40%以上。结论:此种方法扩增的NK细胞其纯度较高,但是因为缺乏其余免疫细胞提供的支撑作用,所以最终NK细胞的扩增倍数并不理想,但其操作简单,花费低,安全性高,可靠性强。

摘要： 探讨特发性膜性肾病(IMN)患者外周血中单个核细胞(PBMC)中GRα和GRβ的表达差异及与临床缓解的相关性.

摘要： 目的：比较不同来源单个核细胞小腿肌间注射治疗2型糖尿病下肢血管病变的有效性及安全性. 方法：选取河北医科大学第一医院内分泌科2型糖尿病下肢血管病变患者60例,随机分为对照组(n=20)、骨髓单个核细胞组(n=20)及脐带血单个核细胞组(n=20),分别给予生理盐水、自体骨髓单个核细胞、脐带血单个核细胞小腿肌间注射.分别于第0、12、24周评估其有效性(静息痛评分、肢体冷感评分、麻木评分、间歇跛行距离、下肢皮肤的温度、经皮氧分压、静息状态下踝肱压指数)及安全性. 结果：治疗后,对照组静息痛评分、肢体冷感评分、麻木评分、间歇跛行距离、下肢皮肤的温度、经皮氧分压、静息状态下踝肱压指数无显著变化(P＞0.05);骨髓单个核细胞组及脐带血单个核细胞组12周时静息痛评分、肢体冷感评分、麻木评分均显著降低(P＜0.01),24周时间歇跛行距离、下肢皮肤的温度、经皮氧分压、静息状态下踝肱压指数均显著改善(P＜0.01),同时间点两组间差异亦无统计学意义(P＞0.05),研究过程均无死亡、肿瘤及增殖性视网膜病变病例报告. 结论：两种来源单个核细胞小腿肌间注射治疗2型糖尿病下肢血管病变均安全、有效,脐带血单个核细胞的疗效不劣于自体骨髓单个核细胞.

摘要： 目的:探讨经内毒素(LPS)刺激不同时间及不同浓度谷氨酰胺(Gln)预处理后对人单个核细胞(PBMC)热休克蛋白70(HSP70)表达的影响.方法:取健康志愿者新鲜外周血滤过的血盘,用生理盐水按1:1稀释血液,用Ficoll-泛影钠(Ficoll-Hypaque)密度梯度离心法提取出PBMC.得到的细胞置入含4ml培养液的细胞培养瓶中,每瓶数量约为1×107个/ml.所有细胞均在37°C含5％CO2的温箱中培养.实验共分为三个部分,第一部分将10mg/L LPS加入培养液中刺激PBMC不同时间(0、2、4、12、24h),留取细胞和培养液上清,采用western blot方法检测HSP70的表达;第二部分将不同浓度Gln(0、1、4、8、10和15mmol/L)加入培养液中,分别处理2h后,加入内毒素10mg/ml刺激2h,留取细胞和培养液上清,采用western blot方法检测HSP70的表达;第三部分以LPS刺激PBMC 2h后,使用10mmol/LGln分别刺激PBMC0.5h、1h、2h、3h后,提取蛋白,留取细胞和培养液上清,用Westernblot检测HSP70表达的变化.结论:Gln可上调内毒素诱导的单个核细胞HSP70的表达。

摘要： 目的：研究乙型肝炎病毒(HBV)感染新生儿单个核细胞(PBMC)情况及其对高效价乙肝免疫球蛋白(HBIG)及乙肝疫苗阻断垂直传播的影响.方法：选择HBV感染产妇257例,孕妇血清HBV-DNA阳性组153例,孕妇血清HBV-DNA阳性组104例.孕妇胎盘娩出后立即无菌抽取脐带血20ml,肝素抗凝,应用淋巴细胞分层液分离UBMC.取分离后的单个核细胞2×105个,PBS洗涤三遍.12000转离心3分钟,取上清液按常规步骤作HBV-DNA检测(PCR定量法),采用Lightcycler (Roch)定量分析仪,1.0× 104以上作为阳性结果统计.用同样方法检测母体血清及婴儿血清中的HBV-DNA.所有新生儿于出生24小时内和生后2周分别注射HBIG200IU,一个月时按0、1、6方案注射基因工程乙肝疫苗,每次10ug.1岁时检测所有被观察者血清HBV-M及HBV-DNA.HBV-M检测采用时间分辨荧光分析法.结果：血清HBV-DNA阳性产妇的新生儿UBMC中24.18％ HBV-DNA阳性,低于该组新生儿血清HBV-DNA阳性率(35.29％,P＜0.05).正规注射HBIG和乙肝疫苗后,新生儿脐血清和UBMC中HBVDNA同时阳性组婴儿1岁时HBsAb阳转率明显低于血清HBV-DNA阳性、UBMC阴性组(50.00％ vs.77.78％,P＜0.05),二者都低于HBVDNA阴性婴儿组(96.67％,P＜0.05).单独血清HBV-DNA阳性和UBMC同时阳性组1岁时HBVDNA阳性率分别为11.11％和15.79％.结论：正常情况下,HBIG联合和乙肝疫苗可有效的阻断HBV的垂直传播.HBV能够感染新生儿PBMC,并因新生期的免疫耐受而造成HBV感染的持续与慢性化.HBV感染的孕妇尤其是HBVDNA阳性者可以通过垂直传播造成婴儿PBMC的感染,并可通过影响PBMC功能而影响新生期的免疫应答,导致患者的不能建立正常的免疫功能,使其对乙肝疫苗的应答降低或表现为无应答,进而降低HBIG联和乙肝疫苗的阻断垂直传播的效果.由于HBIG难以直接中和PBMC内的HBV,这可能是采用HBIG和乙肝疫苗阻断失败的重要原因。

摘要： 目的:建立人急性粒-单核细胞白血病细胞系并研究其生物学特性.方法：从1例急性髓系白血病患者的骨髓标本分离出单个核细胞,用液体培养法进行培养.采用瑞特染色、电子显微镜观察、细胞化学染色、流式细胞仪、R显带核型分析、RT-PCR、荧光原位杂交(FIsH)、半固体甲基纤维素集落培养、裸小鼠致瘤实验、荧光定量PCR、DNA荧光染色法及支原体肉汤培养法、短串联重复序列(STR)-PCR、p53基因的PCR扩增产物测序、多色FISH (M-FISH)和3H-TdR掺入实验等方法对该细胞株的生物学特性进行了鉴定.

摘要： 目的:探讨迟现抗原-4(VLA-4)表达与急性髓系白血病患者预后的关系.方法:收集2010年5月至2011年9月我院收治的30例初诊急性髓系白血病患者的骨髓,应用流式细胞术检测患者骨髓单个核细胞VLA-4表达水平,同时统计患者白血病类型、染色体核型、融合基因表达、化疗反应、无病生存率、总体生存率.

摘要： 目的:评价VEGF和Notch/Dll4通路分子在初诊AML患者中的表达,并进一步在共培养的内皮细胞与白血病细胞中分析这两条通路的生物学联系.方法：采用免疫组织化学、实时荧光定量PCR和Western blot技术检测外周血单个核细胞中VEGF和Notch/Dll4通路分子的表达.MTT检测内皮细胞增殖,体外血管生成实验检测白血病细胞的促血管生成能力.

摘要： 目的:研究miR-19b在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及其与ALL临床特征和PTEN mRNA表达的相关性.方法：采用实时定量PCR检测67例儿童ALL患者骨髓单个核细胞中miR-19b的表达,分析其表达与临床特征及PTEN mRNA表达水平的关系.以15例ITP患儿作为对照.结果:①miR-19b在初诊组、完全缓解组、难治复发组和对照组的表达量分别为3.29 ±0.51、0.81±0.14、6.24 ±0.79和0.49±0.07.miR-19b在初诊组和难治复发组的表达量显著高于完全缓解组和对照组(P＜0.01).

摘要： 目的:研究BMI1在髓系恶性进展中的主要功能及其可能的作用机制.方法：用定量PCR方法检测BMI1在骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓CD34+细胞及慢性髓性白血病(CML)患者骨髓单个核细胞中的表达.分析其临床意义.克隆BMI1并利用逆转录病毒载体转染到U937和K562细胞中.体外研究BMI1表达上调后对细胞活力及细胞分化的调控.

摘要： 目的:探讨急性白血病(AL)骨髓单个核细胞(MNC)中p33ING1b表达及其临床意义.方法：收集65例AL(初发46例,完全缓解12例,复发7例)患者骨髓样本,并以8例骨髓象正常的非恶性血液病患者骨髓为对照.RT-PCR法检测骨髓MNC中p33ING1b mRNA表达水平.结果:p33ING1b mRNA在AL初治组、复发组、缓解组中的阳性率分别为45.7％、42.9％、58.3％,p33ING1b mRNA的表达水平分别为0.203±0.106、0.389±0.027、0.627±0.202;正常对照组的阳性表达率为87.5％ (7/8),实验组的阳性表达率显著低于对照组.

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞的体外提取装置及外周血单个核细胞的提外提取方法。该外周血单个核细胞的体外提取装置的第一轴移动组件和第二轴移动组件通过移动架滑动而带动移液机构在第一轴和第二轴上滑动，且移液机构在移动架上沿第三轴滑动而使移液机构能够伸入容器中，驱动组件给移液机构提供一吸取物质的力和一释放物质的力，以使移液机构能够吸取物质和释放物质，电路控制组件能够根据视觉传感器组件采集的图像计算出样品中的白膜层的位置，并控制第一轴移动组件、第二轴移动组件、驱动组件和移液机构工作以使移液机构吸取样品中的白膜层。上述外周血单个核细胞的体外提取装置的提取率较高且提取的外周血单个核细胞的纯度较高。

摘要： 本发明提供了一种从脐带血分离总有核细胞与单个核细胞的方法：首先分离TNCs：脐带血中加入含5%右旋糖酐及2%人血清白蛋白的PBS缓冲液，离心弃上清，获得TNCs沉淀I；沉淀洗涤后获得TNCs沉淀；将TNCs沉淀用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心，收集单个核细胞白膜层，离心后获得单个核细胞沉淀。该方法高效、方便、省时、可重复性高，可以利用脐血库丰富的冻存脐血资源，提高冻存脐带血中衍生干细胞和免疫细胞的分离效率。

摘要： 本发明公开了一种白细胞介素21和4‑1BBL诱导外周血单个核细胞中NK细胞增殖的方法。该方法包括如下步骤：将初始NK细胞与固相化的细胞因子共培养，使NK细胞增殖。实验结果表明：利用固定化的细胞因子直接刺激未经筛选的人外周血中的淋巴细胞群，大量扩增了具有杀伤活性的原代NK细胞，并将刺激NK细胞的信号传导转化为人为可控的形式，在临床上为NK细胞治疗提供了安全有效、便利且效果稳定的扩增方案，并为随后的改造NK细胞和研究信号传导机制提供基础研究。

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞核纹理分析方法，该方法包括如下步骤：首先对外周血细胞进行染色，然后摄取经染色后的外周血细胞的核表面图像，接着对核表面图像进行曲线波变换，得到一与所述核表面图像的图像特征相对应的系数矩阵，最后对系数矩阵进行变换处理完成对核表面图像的分类识别。与现有技术相比，本发明的优点在于：将曲线波变换结合模式识别应用于外周血单个核细胞的核纹理图像分析，准确高效地实现了正常细胞与病态细胞的分类识别。在不需要昂贵的仪器和试剂的条件下，就能实现快速初步判断HIV载量与外周血中单个核细胞受损程度方面有一定的参考意义。

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞的体外提取装置及外周血单个核细胞的提外提取方法。该外周血单个核细胞的体外提取装置的第一轴移动组件和第二轴移动组件通过移动架滑动而带动移液机构在第一轴和第二轴上滑动，且移液机构在移动架上沿第三轴滑动而使移液机构能够伸入容器中，驱动组件给移液机构提供一吸取物质的力和一释放物质的力，以使移液机构能够吸取物质和释放物质，电路控制组件能够根据视觉传感器组件采集的图像计算出样品中的白膜层的位置，并控制第一轴移动组件、第二轴移动组件、驱动组件和移液机构工作以使移液机构吸取样品中的白膜层。上述外周血单个核细胞的体外提取装置的提取率较高且提取的外周血单个核细胞的纯度较高。

摘要： 本发明提供了一种从脐带血分离总有核细胞与单个核细胞的方法：首先分离TNCs：脐带血中加入含5%右旋糖酐及2%人血清白蛋白的PBS缓冲液，离心弃上清，获得TNCs沉淀I；沉淀洗涤后获得TNCs沉淀；将TNCs沉淀用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心，收集单个核细胞白膜层，离心后获得单个核细胞沉淀。该方法高效、方便、省时、可重复性高，可以利用脐血库丰富的冻存脐血资源，提高冻存脐带血中衍生干细胞和免疫细胞的分离效率。

摘要： 本发明公开了将单个核细胞复苏并诱导为多种细胞因子诱导的杀伤细胞的方法。该方法包括：将冷冻保存的单个核细胞置于37‑42°C水浴中融化，以便得到融化的单个核细胞；将所述融化的单个核细胞与用于多种细胞因子诱导的杀伤细胞的冷冻复苏液混合，以便得到复苏细胞混合液，其中，所述冷冻复苏液包含白蛋白和右旋糖酐；将所述复苏细胞混合液进行离心处理，以便得到复苏细胞；以及将所述复苏细胞进行定向诱导处理，以便得到诱导后的多种细胞因子诱导的杀伤细胞。该方法复苏得到的单个核细胞，在后续的诱导、扩增过程中，获得的多种细胞因子诱导的杀伤细胞增殖速率快，诱导分化效率高，细胞活性好。

摘要： 本发明公开了一种白细胞介素21和4-1BBL诱导外周血单个核细胞中NK细胞增殖的方法。该方法包括如下步骤：将初始NK细胞与固相化的细胞因子共培养，使NK细胞增殖。实验结果表明：利用固定化的细胞因子直接刺激未经筛选的人外周血中的淋巴细胞群，大量扩增了具有杀伤活性的原代NK细胞，并将刺激NK细胞的信号传导转化为人为可控的形式，在临床上为NK细胞治疗提供了安全有效、便利且效果稳定的扩增方案，并为随后的改造NK细胞和研究信号传导机制提供基础研究。

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞核纹理分析方法，该方法包括如下步骤：首先对外周血细胞进行染色，然后摄取经染色后的外周血细胞的核表面图像，接着对核表面图像进行曲线波变换，得到一与所述核表面图像的图像特征相对应的系数矩阵，最后对系数矩阵进行变换处理完成对核表面图像的分类识别。与现有技术相比，本发明的优点在于：将曲线波变换结合模式识别应用于外周血单个核细胞的核纹理图像分析，准确高效地实现了正常细胞与病态细胞的分类识别。在不需要昂贵的仪器和试剂的条件下，就能实现快速初步判断HIV载量与外周血中单个核细胞受损程度方面有一定的参考意义。

摘要： 本申请属于生物技术领域，尤其涉及一种利用脐带血单个核细胞生产自然杀伤细胞的方法，将从脐带血中分离的单个核细胞混合物与同源脐带间充质干细胞共进行共培养处理，从而将所有种类的单个核细胞扩增3‑15倍，然后将单个核细胞混合物中除NK细胞以外的其他细胞诱导分化为NK细胞，再进行扩增处理，扩增倍数可达195倍以上，最大效率利用单位脐带血中的单个核细胞，采用本方法扩增生产的NK细胞与原单位脐带血中的NK细胞相比，数量上可增加几百甚至数千倍。