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枳壳外植体离体再生及农杆菌介导的遗传转化

         

摘要

以枳壳(PoncirustrifoliataRaf)实生苗的上胚轴及茎段为材料,在附加有BA和MT培养基上进行培养,上胚轴出芽率普遍高于茎段,BA为1mg/L时,出芽率最高(860%),BA浓度升高,出芽率随之下降。外植体在培养基上的接种方式,对出芽有一定影响,上胚轴切段以形态学下端垂直插入,出芽率高。枳壳上胚轴进行遗传转化,卡那霉素作为选择试剂,浓度为50mg/L。抑菌剂的使用,以头孢霉素较好,不仅杀菌效果好,且对外植体出芽无明显抑制作用。外植体与农杆菌共培养后,在含卡那霉素的培养基上,抗性芽发生率为142%,GUS基因表达检测结果,抗性植株中,GUS反应呈阳性所占比例为700%。

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