人白细胞介素10基因慢病毒载体的构建及重组

贺正华; 白念岳; 郭曲练

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人白细胞介素10基因慢病毒载体的构建及重组

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目的拟构建含人白细胞介素10(hIL-10)基因的慢病毒载体(LV-hIL-10),为进一步探讨慢性疼痛的治疗研究奠定基础。方法从pCYIL-10质粒中选择适当的引物进行PCR后得到含PmeI多功能酶切位点的IL-10基因片段,将其构建到慢病毒载体pWPXL上得到重组的pWPXL-IL-10质粒,对所抽提的质粒进行酶切及测序检测正确后大量提取备用。将重组质粒pWPXL-IL-10、包膜质粒pMD2.G和包装质粒psPAX2共转染293T细胞后包装出复制缺陷的慢病毒颗粒,进行病毒滴度的测定。结果重组质粒酶切鉴定结果显示,pWPXL-IL-10质粒中有一个530bp左右的插入片断,大小与IL-l0cDNA(534bp)基本符合。测序结果显示pWPXL-IL-10质粒上插入片段的序列与基因库中hIL-10基因序列完全一致。转染后获得了高滴度(2×1010)、高纯度的病毒颗粒。结论成功构建了含人白细胞介素10基因的慢病毒载体LV-hIL-10,为慢性疼痛治疗的研究奠定了基础。

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来源
《中国普通外科杂志》 |2008年第8期|793-797|共5页
作者
贺正华; 白念岳; 郭曲练;
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作者单位

中南大学湘雅医院麻醉科;

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正文语种 chi
中图分类 R34-33;
关键词
慢病毒载体; 人白细胞介素10; 治疗; 基因;

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