应用复合纯化介质Capto Core700纯化狂犬病疫苗

李旭; 徐威; 于海; 陈志成

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应用复合纯化介质Capto Core700纯化狂犬病疫苗

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目的应用复合凝胶Capto Core700作为纯化介质去除狂犬病疫苗中的Vero细胞宿主蛋白和宿主细胞DNA等杂质。方法将Vero细胞接种至微载体,在celligen plus生物反应器中培养,按MOI=0.002接种狂犬病病毒,连续制备10批狂犬病疫苗原液。经过滤及浓缩后加入β-丙内酯,于2~8℃灭活24 h,获得病毒灭活液。上样至装载复合凝胶Capto Core700的纯化柱进行层析纯化,并按《中国药典》三部(2015版)的方法检测宿主细胞蛋白去除率、宿主细胞DNA去除率、狂犬病病毒糖蛋白回收率及总蛋白去除率。同时与传统Sepharose系列凝胶纯化方法进行比较。结果 10批疫苗纯化液的宿主细胞蛋白去除率为58.3%~63.2%,宿主细胞DNA去除率均>90%,糖蛋白回收率范围为52.3%~74.5%,蛋白去除率范围为7.22%~11.76%。与传统Sepharose系列凝胶纯化方法比较,差异较小,且Capto Core700的上样量为3倍柱体积,高于Sepharose凝胶(15%)。结论 Capto Core700凝胶可有效去除狂犬病疫苗中的杂质,缩短了纯化工艺时间。

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来源
《中国生物制品学杂志》 |2018年第5期|538-542|共5页
作者
李旭; 徐威; 于海; 陈志成;
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作者单位

辽宁成大生物股份有限公司;

辽宁沈阳100179;

沈阳医科大学;

辽宁沈阳110016;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类其他病毒;免疫学技术、设备及实验方法;
关键词
狂犬病疫苗; Vero细胞宿主蛋白; Vero细胞宿主DNA; Capto; Core700;

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