细胞角蛋白19片段抗原21-1含量化学发光微粒子定量免疫检测方法的建立

王英雪; 郭小怡; 刘江武; 翁祖星; 葛胜祥; 陈毅歆

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目的建立细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1,简称CY21-1)含量的化学发光微粒子免疫检测方法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)。方法原核表达制备重组CY21-1(r CY21-1),用其免疫BALB/c小鼠后,收集小鼠脾脏细胞,常规杂交瘤技术与Sp2/0进行融合,制备CY21-1单抗。间接ELISA法筛选可稳定分泌CY21-1抗体的杂交瘤细胞,分别标记微性磁珠(magnetic beads,MB)和吖啶酯(acridinium ester,AE),筛选可特异检测CY21-1的单抗配对,建立CY21-1 CMIA,同时验证方法的线性及灵敏度,并与同类试剂盒进行比较。结果经筛选获得了一组能特异检测CY21-1的单抗配对MB*26B5-3E4*AE,建立的CY21-1 CMIA对检测CY21-1校准品的线性范围为0.1~1 000 ng/m L,R^2=0.992 3,检测灵敏度为0.076 ng/m L。该方法与美国雅培公司生产的Abbott CY21-1 CMIA诊断试剂盒平行检测250份临床血清标本的结果具有良好的相关性(R^2=0.961 6)。结论成功建立了CY21-1 CMIA,且具有良好的线性及灵敏度,为我国肺癌的临床筛查和早期诊断奠定了基础。

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来源
《中国生物制品学杂志》 |2018年第5期|523-527|共5页
作者
王英雪; 郭小怡; 刘江武; 翁祖星; 葛胜祥; 陈毅歆;
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作者单位

厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院;

福建厦门361102;

厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院;

福建厦门361102;

厦门万泰凯瑞生物技术有限公司;

福建厦门361000;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类免疫学技术、设备及实验方法;
关键词
细胞角蛋白19片段抗原21-1; 单克隆抗体; 化学发光微粒子免疫检测方法; 非小细胞肺癌;

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