梅山猪LH-β基因真核表达系统的构建及体内外转染表达效果的研究

吕学斌; 李江凌; 高荣; 武梅; 杨毅; 王丽焕; 刘世贵

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将克隆的梅山猪LH-β基因亚克隆到真核表达型载体VR1020上,通过质粒PCR的方法在转化子中筛选阳性克隆,用BamH Ⅰ、BglⅡ双酶切鉴定重组子.得到的重组真核表达质粒转染Cos7细胞株,RT-PCR检测猪LH-β表达情况.然后用VPLH-β质粒、VR1020分别肌肉注射小鼠,研究了小鼠的生殖特性情况.结果显示:通过质粒PCR和双酶切分析,得到猪LH-β基因以正确方向插入的重组真核表达质粒VPLH-β.重组质粒VPLH-β经脂质体介导转染Cos7细胞,培养不同时间后提取mRNA进行RT-PCR,发现转染细胞RNA中含有与LH-β基因对应的mRNA;结果表明已成功构建了PLH-β的真核表达质粒,能正确转录表达LH-β.动物试验结果显示PLH-β免疫小鼠后的各项指标均高于对照处理.克隆构建的猪VPLH-β质粒能发挥明显的生殖生理调节作用,可较好地促进雌性动物的排卵、怀孕和正常产仔.

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来源
《畜牧兽医学报》 |2005年第9期|877-881|共5页
作者
吕学斌; 李江凌; 高荣; 武梅; 杨毅; 王丽焕; 刘世贵;
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作者单位

四川省畜牧科学研究院,成都,610066;

四川省畜牧科学研究院,成都,610066;

四川大学生命科学学院,成都,610064;

四川大学生命科学学院,成都,610064;

四川大学生命科学学院,成都,610064;

四川大学生命科学学院,成都,610064;

四川大学生命科学学院,成都,610064;

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正文语种 chi
中图分类 S828.2;
关键词
猪; LH-β基因; 真核表达; 转染; 生殖; 小鼠;

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