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牛白细胞介素18成熟蛋白cDNA基因的克隆和表达

         
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摘要

应用RT-PCR技术分别从脂多糖(LPS)活化的牛脾脏细胞和肺泡巨噬细胞中克隆到编码牛白细胞介素(bIL-)18成熟蛋白的cDNA基因,其大小为480 bp.将bIL-18克隆到pET32a(+)质粒中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析,得到了分子量为38ku的融合蛋白,该蛋白经纯化并复性后,具有诱导MDBK分泌IFN-γ的活性,并且可以刺激ConA活化的外周血单核细胞(PBMC)增殖.使用半定量RT-PCR对其mRNA的体内表达进行了测定,发现不论是否加入刺激剂,牛巨噬细胞都可以持续的表达IL-18 mRNA,但是被LPS活化的PBMC只有微弱表达,肝和脾细胞经LPS活化后也可以检测到IL-18 mRNA的表达,其水平明显高于PBMC,在不同细胞中表达的差异可能反映了其产生成熟IL-18的能力.

著录项

  • 来源
    《畜牧兽医学报》 |2005年第9期|873-876|共4页
  • 作者

    刘文强; 胡敬东; 杨少华; 赵宏坤; 高运东; 仲跻峰;

  • 作者单位

    山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;

    山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;

    山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100;

    山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;

    山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100;

    山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100;

    山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 兽医基础科学;
  • 关键词

    牛; 白细胞介素18; RT-PCR;

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