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寡核苷酸芯片检测兽医病原菌耐氟喹诺酮类药物基因突变

摘要

目的 研究寡核苷酸芯片的制备,及其检测兽医临床常见病原菌耐氟喹诺酮类药物基因突变的准确性和可行性.方法根据耐药基因型,分别对大肠杆菌gyrA、parC,沙门氏菌、链球菌和鸡毒支原体gyrA基因序列设计通用引物和13条寡核苷酸探针,制备寡核苷酸芯片.采用PCR荧光标记目的基因,与芯片杂交,同时采用PCR-测序法进行耐氟喹诺酮类药物基因突变的检测.结果 PCR反应体系能特异性地扩增目的基因;制备的寡核苷酸芯片能检测病原菌gyrA基因83、87位,parC 80位野生型和突变型,芯片检测结果与测序结果符合率为75%.结论采用寡核苷酸芯片技术检测病原菌基因突变是可行的,随着技术的成熟,可以用于兽医临床耐药性大规模的检测.

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